經過研究，發現不同的解凍方法對乳汁中的蛋白質含量有顯著的影響。在冷藏解凍過程中，蛋白質的損失相對較少，而快速解凍則會導致蛋白質的顯著下降。因此，建議使用4℃的冷藏方法來解凍冷凍母乳，這通常需要24小時的時間，這種方式可以極大地降低營養的流失。如果沒有提前把冷凍的母乳放入冷藏，也可以選擇用流水來解凍。在冰箱內放置時間過長可能導致脂肪氧化而變質，所以最好不要長時間存放。解凍過程結束后，可以選擇使用溫奶器進行加熱，或者采用60℃以下的溫熱水進行隔水加熱，但要注意水位不能超過奶瓶蓋或奶袋的封口，以避免對奶水造成污染。
從基礎營養學的視角來看，通常不建議使用微波爐或溫熱水進行直接解凍，因為快速或高溫解凍可能會對母乳中的蛋白質造成變性、氧化或損失。因此，在選擇母乳解凍方法時，應根據具體情況而定，不能一概而論。另外，建議不要直接將冷凍的母乳在常溫下解凍，因為這可能導致細菌的繁殖和母乳的變質。
另外，鑒于母乳中的油脂含量較高，冷凍后可能會導致其分層。在加熱時，需要輕輕搖動以確保其均勻混合和加熱，但同時也應避免過度搖晃。另外，應盡量將母乳放在低溫環境下保存，防止發生干硬化或變質。務必避免使用微波爐進行加熱，同時也不要直接將其加熱至沸騰，以免過度損害母乳中的營養元素。另外，在嬰兒進食前，應將奶嘴放在奶瓶上輕輕攪動一下，以免因晃動而引起食物灑落和污染。需要特別提醒的是，未消耗完的母乳不應再次存放在冷藏中，而應考慮丟棄。