試管嬰兒打夜針的時間，主要依據卵泡大小、數量和激素水平決定。一般當兩側卵巢內大于18mm的卵泡有2-3個時，就可以打夜針。一般高齡女性的卵泡數目較少，打夜針的時間會相對靠前，以防取卵當日卵泡提前排卵破裂，導致取卵失敗。
夜針就是注射人絨毛膜促性腺激素，當女性在做試管嬰兒時，需要在合適的時間注射人絨毛膜促性腺激素，以促進卵子的快速成熟。打夜針后，一般情況下是在34-36小時后進行排卵，為不影響白天取卵，所以一般會在夜里注射藥物，因此得名打夜針。當雌二醇小于40pg/ml，兩側卵巢有至少兩個卵泡在15-20mm時，就可以打夜針。
夜針的注射時間一定要按照醫生囑咐的時間執行，并且要足量注射藥物，不能漏打、少打，或者不按時間注射。注射夜針之后要避免同房、避免劇烈的運動，并按照要求在指定的時間內進行取卵。