金霉素眼膏有消炎保濕、隔離光線的作用，可直接擠到眼睛里，正確使用金霉素眼膏的方法是清潔雙手后，擠入眼膏至眼瞼穹窿部，用眼皮包裹住，第二天早上起床后再清洗掉，只有將金霉素眼膏擠入眼睛里才能發揮作用。
金霉素眼膏對多種革蘭氏陽性菌和革蘭氏陰性菌、立克次體、衣原體、支原體都有一定的抑制作用，可用于急性沙眼、結膜炎、角膜炎、瞼腺炎以及麥粒腫等。使用金霉素眼膏時可能會有輕微的刺激感，少部分人會出現過敏反應，表現為眼睛癢、眼部充血、眼球水腫等。日常生活中要注意少揉眼，勿用眼過度，少熬夜，注意清淡飲食，如果眼睛出現很強的不適感如疼痛劇烈、發紅等，建議及時前往醫院完善檢查，查明病因，積極配合治療。
需要特別注意對金霉素眼膏過敏者禁用，對大環內酯類以及四環素類過敏者禁用，孕婦和哺乳期婦女禁用。不建議長期連續的使用，如果使用5日后癥狀還沒有得到緩解，應及時停藥。