氨芐青霉素抗菌譜與青霉素類似，對大腸桿菌、白色葡萄球菌、四疊球菌等敏感菌具有抑制殺滅作用，可用以抑制革蘭陰性菌在體內的繁殖，但容易產生耐藥性。
氨芐青霉素屬于廣譜半合成青霉素，毒性較低，該藥物主要適用于敏感菌所致的鼻竇炎、中耳炎、細菌性肺炎等呼吸系統疾病，也可減輕尿路感染、腎盂腎炎等泌尿系統疾病，同時也可以用于治療子宮內膜炎、膽囊炎、腹膜炎等腹腔內感染，對于細菌性菌血癥、皮膚軟組織及骨關節感染也有一定作用。不過需要注意的是，雖然氨芐青霉素對大腸桿菌、白色葡萄球菌、四疊球菌有抑制作用，且該藥物對于白喉桿菌、破傷風桿菌和放線菌的抑制作用與青霉素大致相同，但由于該藥屬于半合成青霉素，故青霉素過敏及青霉素皮膚試驗陽性者同樣需禁用氨芐青霉素，以便引起皮疹、惡心、嘔吐、腹瀉等不良反應。
如果患者大腸埃希菌、變形桿菌感染較為嚴重，通常可遵醫囑將氨芐青霉素聯合卡那霉素進行治療，能夠發揮更好的療效。但需注意，該藥物屬抗生素，不可長期用藥，建議遵醫囑足療程使用，如用藥后病情未得以及時控制，需及時停藥就醫。