十六歲睪丸痛，可能是由于精索靜脈曲張、鞘膜積液、睪丸扭轉、睪丸腫瘤引起，若睪丸偶爾出現疼痛，可以暫時進行觀察，如果睪丸疼痛頻繁發作，需要及時去醫院進行治療。
1、精索靜脈曲張：可能與靜脈瓣膜功能不全、靜脈回流障礙等因素有關，久站以及合并患有相關疾病等是常見的誘發因素，一般無癥狀，僅在體檢時發現，而癥狀嚴重者可表現為患側陰囊增大，伴墜脹感、疼痛，步行或久站則癥狀加重；
2、鞘膜積液：通常由睪丸及其附近組織的炎癥或手術創傷引起，可能會導致局部滲出增多，表現為陰囊內腫物增大及下墜感、疼痛感，但少量的鞘膜積液一般不會引起疼痛，當積液量比較多時，會引起患側睪丸疼痛，而且陰囊會腫脹；
3、睪丸扭轉：主要是由于劇烈運動或陰囊損傷等因素可誘發支配睪丸的精索發生扭轉，容易導致血管受到擠壓，進而阻斷睪丸的血液供應，引起睪丸缺血，患者會出現睪丸腫脹和劇烈疼痛；
4、睪丸腫瘤：可能與種族、遺傳、化學致癌物質、感染、內分泌等因素有關，由于腫瘤早期疼痛不明顯，當腫瘤體積較大時，容易壓迫、牽拉周圍神經和軟組織，可能會表現為睪丸痛的情況。