如果只是單純做血培養，一般不需要空腹。血培養是把靜脈穿刺獲得的血液，接到一個或多個培養瓶或培養管中，用來發現、識別細菌，或其他可培養分離的微生物(如大腸桿菌、念珠菌屬、真菌屬等)。這些微生物存在于血液中，可形成菌血癥或真菌血癥。在患者的血液中檢測出微生物對感染性疾病的診斷、治療和預后有重要的臨床意義，所以部分情況下需要做血培養。但是否空腹并不影響血液中微生物的含量，所以一般不需要空腹。
需要注意的是，血培養如果是和其他生化項目，如肝腎功能、血糖、血脂等一同檢測，則此時需空腹，以免影響檢查結果。在檢查前幾天建議飲食以清淡為主，禁忌抽煙喝酒，以免影響其他化驗結果的準確性。此外血培養標本采集時，應嚴格執行無菌操作，可避免影響檢查結果和患者的健康。